Preditox : genetic assays for safety use

Validation

Updated : 10/10/2017

La validation du test γH2AX a été réalisée sur des cellules humaines HepG2 avec la liste des 62 composés, génotoxiques ou non, préconisés par l’European Union Reference Laboratory for alternatives to animal testing (EURL-ECVAM) (Kirkland et al. 2008). Nous avons démontré que ce test permettait de détecter 95 % des composés cancérigènes testés (seulement 71 % pour le test d'Ames) sans pour autant avoir de composé faux positif (voir référence, Khoury et al. 2013).

Le test γH2AX/pH3 est en cours d'évaluation au sein de l'EURL-ECVAM. Des discussions à l'OCDE pour l'utilisation de cette méthode est également en cours.

Actuellement, nous avons testés plus de 700 composés avec cette technique sur de nombreuses lignées cellulaires humaines.

Résultats obtenus avec le test γH2AX par la technique de l'In-Cell Western, avec la liste des composés de l'ECVAM. Tableau extrait de notre publication «Validation of High-Throughput Genotoxicity Assay Screening Using the γH2AX In-Cell Western Assay on HepG2 Cells, Khoury et al. 2013».

Comparaison avec d'autres tests de génotoxicité : nous avons comparé les performances du test γH2AX en ICW avec le test standard Ames (Kirkland et al 2008) et le test du micronoyau (MN) sur des cellules humaines HepG2 (Westerink et al 2011), en utilisant différents paramètres: sensibilité, spécificité et prédictivité, et en suivant la liste de composé fournie pour l'ECVAM. Nous avons trouvé une très bonne corrélation entre ces trois essais, suggérant que le test in vitro γH2AX en ICW pourrait être un test approprié pour prédire la cancérogénicité in vivo des produits chimiques.